G1321A安捷伦荧光检测器G1321A FLD

可能原因：溶剂进口过滤芯堵塞；溶剂未脱气；泵的密封垫老化；出口单向阀失效；主动阀失效。

最常见原因：泵内有气泡

2.常见色谱故障——压力过低

可能原因：溶剂进口过滤芯堵塞；连接管路泄漏或其它备件（泵头密封垫）；溶剂或流速改变；主动阀失灵；四元比例阀失灵；单向出口阀失灵；色谱柱失效（固定相流失）。

3.常见色谱故障——压力过高

可能原因：柱子进口过滤芯被污染；PURGE（排气）阀过滤芯被污染；色谱柱被污染；连接管路，尤其是针座毛细管堵塞；进样器旋转密封阀被堵塞；进样针或针座被阻塞

4.常见色谱故障——基线噪音

                                  是—检测器？安捷伦荧光检测器G1321A FLD

基线噪音——停泵——噪音是否依然存在---

                                       否—泵或流动相？

其它要考虑的问题：是否改变了流动相的组成？是否改变了检测波长？在你的仪器上使用的最后的流动相是什么？流动相是否相溶？流动相是否干净？

避免流动相中产生气泡的最佳方式是将流动相经脱气装置进行脱气。如果没有脱气装置，则可以在流动相溶剂瓶中通入氦气进行脱气。也可以在检测器的出口端加一根细管线以调节流动池中的背压，但必须注意不要超过流动池的最大压力，否则会造成流动池漏液或流动池损坏。

如果流动池中出现气泡，则先摘下色谱柱，用一根管线直接将流动相接入检测器的入口。将异丙醇以较大的流速注入流动池。直到基线上看不到毛刺为止。气泡就应该清除掉了。

无规律噪音可能与污染有关。请冲洗色谱柱，对样品做合适的前处理以避免污染，并使用 HPLC 级别的溶剂。

连续噪音有可能由检测器或泵造成。要确定问题是否发生在检测器还是在泵，请先关泵停掉流量，监测基线。如果此时基线平稳，则噪音可能与泵有关系。使用 ChemStation 在线诊断或 LC 手持控制器检查泵方面的故障。如果停泵后噪音继续存在，则说明噪音与检测器有关。首先，请尝试更换灯。如果问题依然存在，则请与安捷伦科技公司联系。在中国，请拨打 800 820 3278。安捷伦荧光检测器G1321A FLD

这很有可能是流动池内有气泡。请先停泵来进行确认，如果毛剌消失，则很有可能是由于流动池内有气泡。需要冲洗流动池。如果毛剌仍然存在，则需检查检测器本身的电噪音有关。如果需要更多帮助，则请致电安捷伦科技公司。在中国，请拨打 800 820 3278。

可能的原因：上次进样遗留组分产生；有污染；有气泡；色谱柱问题；保护柱失效。

建议用户：做样品后应保证有足够时间冲洗色谱柱，有必要的话在运行结束后使用更强溶剂冲洗色谱柱；

洗脱原色谱柱中得原有污染；为确保系统中没有气泡，只使用彻底脱气后的溶剂；更换色谱柱；

更换保护柱；检查流动相纯度；检查样品中的其它成分。

许多色谱人员在测试一定数量的样品和标准样后更换保护柱。样品数量通常由实验决定，在长时间未更换保护柱而造成分析柱破损时或样品分析数量增加，而保护柱需要更换。

保护柱的更换频率通常根据经验而定，按照每个方法/样品类型综合考虑，但是许多分析人员会在完成一定数量的样品分析或测试一些柱的性能指标（例如增加10%峰展宽或拖尾因子，或降低10%的柱效（塔板数））后更换保护柱。

开发一个RPLC方法有很多不同的途径。目前，很多HPLC专家的一般经验建议，方法开发可从一个低 pH值(pH 2-3.5)开始，使用C8或C18色谱柱。他们还建议使用共轭酸-共轭碱作缓冲溶液，如浓度为20-50mM的NaH2PO4/H3PO4。其他可用于控制pH值的添加剂包括但不限于：0.05-0.1% v/v三氟乙酸(TFA)、0.1-0.4%甲酸、0.1-1%乙酸和用磷酸调节pH值的水（pH最高为2.9以确保pH控制正常）。

有关更多信息，请参考由于方法的重要性、范围和/或使用的不断增加，请务必记住始终同时进行方法开发和方法确认。方法确认可以在方法开发的开始阶段就进行简单的选择性、进样和分析重复性测试。

可能的原因：吹扫阀的PTFE滤芯堵塞；压力上限设置太低；压力传感器堵塞

建议的措施：打开排气阀。如果压力依然很高，则更换排气阀的PTFE滤芯；查看软件的压力上限设置并确保设置值适于分析；检查系统内的堵塞部位（如下所述）：安捷伦荧光检测器G1321A FLD

要检查是否堵塞，请采用隔离系统的方法来排除故障：将安装的色谱柱、预色谱柱和预色谱柱过滤器摘开。

1.如果压力恢复到正常值，则在色谱柱的位置安装ZDV接头。安捷伦荧光检测器G1321A FLD

      如果压力正常，则色谱柱、预色谱柱或过滤器是产生问题的原因。请进行更换。

      如果压力依然很高，则在色谱柱的另一端查找堵塞位置（例如：通入检测器或从其通出的管路）。

2.如果取出色谱柱后压力依然很高，则检查从排气阀到自动进样器的管路。如果压力正常，则使用进样步骤命令将自动进样器的取样阀切换到路模式。

      如果压力正常，则说明自动进样器堵塞。请检查针、针座、针座毛细管和转子密封垫。

      如果压力依然很高，则检查从进样六通阀到色谱柱入口之间的管路。

泵密封圈应定期更换。建议每个液相色谱仪用户建立一个泵密封圈更换的定期检修计划。这应根据泵的使用和流动相组成情况而定。由于它们易磨损的特点，盐缓冲大大加速密封圈和活塞的磨损。

在活塞下面的泵头上检测到泄漏时，保留时间不稳定时，或系统压力不稳定时，都应更换密封圈。请按照以下程序更换所维护的泵的密封圈。安捷伦荧光检测器G1321A FLD

强度测试是内置的UV / Vis检测器诊断测试功能. 是用于测试光学单元在全波长范围内的性能。安捷伦化学工作站在多个波长范围测量检测器的光谱强度，针对每个范围的极限值报告Pass（通过）/ Fail（失败）状态。

这一测试的失败是由于：灯老化了；流通池中有吸光的溶剂/空气泡；流通池脏了/污染了；光学窗口/透镜等被污染了。

要纠正这些问题，需要在流通池充满水/并用足够的时间让检测器稳定。检查开灯的运行时间，并当其寿命到期时更换之。用甲醇/无棉布清洗光学窗口。

1200VWD和1200VWD S有什么区别? 

1200 VWD SL能够实现超快速LC分析，因为其数据采集速率为27Hz到55Hz。而1100 VWD的数据采集速率为14HZ。

标准HPLC柱和RRLC柱有何区别? 安捷伦荧光检测器G1321A FLD

一般来说，RRLC (快速分离液相色谱)柱有较小的填料粒度- 1.8微米，而传统的柱为2到10微米。 

由于填料粒度小，故比普通柱的操作压力(400 Bar)高(600 Bar )。

如果一个固件版本为A.05.11或更高的主板安装在已有的模块上，所有模块都必须升级为固件版本

A.05.11或更高，固件版本A.05.11不允许采用混合版本。

注意：如果使用非安捷伦软件，请咨询软件生产商有关固件兼容性的问题。

最经常的进样阀维护之一就是更换转子密封件。

需要更换的标志包括：转子密封垫堵塞；转子密封垫中接头点之间泄漏

通过观察注射针从样品瓶抽取样品后抬起时，针头有流动相液滴渗出，就可判断接头点之间有泄漏。

注意：接头点之间泄漏也可通过压力测试来判断。

当您发现进样体积精度变差时，您可能首先要考虑接头点之间有泄漏。

1200系列VWD SL，MWD SL，DAD SL检测器的灯和流通池有辐射频率识别（RFID）标签。

RFID标签记录一次运行的必要仪器条件数据。

这些数据储存在原始数据文件中。

安捷伦1100采用新的ZORBAX快速分离（RRHT）柱既是可能的也是实用的。然而，要完全实现RRHT色谱柱的优点，最重要的是要对标准1100HPLC作几处小的改进。对于等度或梯度分离，检测器响应时间必须从默认值(2秒)减少到较小的值(0.1秒)。这很容易在化学工作站的检测器设置屏幕实现。此外，柱外体积和其他流路的效应必须最小化，比如连接管的长度和内径，检测器流通池体积和进样量。从进样口到色谱柱和从色谱柱到检测器的管线必须从“绿色”管线(0.17mm i.d.)改用“红色”管线(0.12 mm i.d.)。应该采用5-uL DAD流通池(部件号G1315-60011)替换安捷伦1100DAD标准配置的13-uL流通池。进样体积应当与色谱柱长度的减小成比例地减小。安捷伦荧光检测器G1321A FLD

对于梯度分离，需要有几个额外的改进以优化性能和最小化循环时间。为了实现快速梯度并最小化重新平衡时间，系统的死体积应当最小化。所以，推荐使用二元泵而不是四元泵，要么不用混合器，要么采用体积较小的混合器替代，如LC/MS混合器 (部件号5022-2165)。应当使用孔板自动进样器（也可采用样品瓶板）达到最短的循环时间(短至15秒)，以实现RRHT色谱柱的最高通量应用。

该问题应该与流速有关。拆下流通池检查基线。如果问题消除了，说明流通池被污染了(更换/清洗检测窗口)，或者泵/进样器有问题。或者该问题在光学系统或光学系统的部件。或者更换整个光源透镜组件（部件号G1315-65201）(或者组件的单个部件，如光谱窗口，部件号79880-28111以及单色器透镜，部件号1000-0486)，或者更换检测池支持窗口G1315-65202。如果问题仍然存在，请联系您最近的安捷伦技术代表。安捷伦荧光检测器G1321A FLD

确定冲洗阀滤芯是否需要更换的常见方法是打开冲洗阀，设定甲醇流速为1 ml/min。如果压力大于7 BAR，就应该更换滤芯。

自动进样器进样阀中的转子密封垫可能部分堵塞了。请清洗转子密封垫或者更换之。

当关闭泵冲洗阀时出现高压的原因有多个，某些可能的原因是：

如果系统有自动进样器模块，针底座、注射针或样品定量环可能堵塞了，需要清洗或更换。一般来说，针底座出现这种问题的可能性较大。

    连接该模块的毛细管之一可能部分被堵塞，需要清洗或更换。

    检测器流通池的入口和出口可能堵塞。一般来说，流通池的出口毛细管易出现这种问题。

传动部分的马达运行时所需电流过大，引起过热。处理器将马达关掉，以免损坏它。

可能的原因: 机械故障；传动部分摩擦力过大；马达皮带张力过高；马达损坏；传动部分弯板损坏

建议: 关掉自动进样器电源开关。等至少10秒钟之后再开开关；确认传动部分的运动不受阻碍；更换传动部分。

用工作站诊断功能作池体测试，是比较流动池二极管的样品边与参考边所测到的氘灯强度。

强度比值的结果(样品:参考)是测试流动池吸收的光的量。测试可用来检验流动池窗口是脏了或者被污染了。用水通过流动池作测试。

工作站自动计算强度比值。强度比取决于流动池窗口污染的程度。以及所用的流动池的类型。理想的比值是1，比值为7或更大也可以接受。比值较低，说明流动池窗口有一些涂层或者流动池里有气泡。更多的光被流动池吸收。

用水冲洗流通池以去除污染物。这样可以来代替溶剂，用水来冲洗。这时样品溶解在水中。

最大的可能是它已经超过使用期限了或者坏了。根据检测器类型作诊断测试。如果需要，更换灯。如果问题依然存在，请联系Agilent公司。安捷伦荧光检测器G1321A FLD

更换泵密封件有一个规则。建议每一个液相使用者建立一个更换泵密封件的预先维护时间表。这要以泵的使用情况和流动相两项为准。由于它们的磨损本性，含盐的缓冲液会大大加速密封垫和柱塞的磨损。

当泵头柱塞下面检查出漏液时，当保留时间不稳定时，或者当系统的压力不稳定时，就应更换密封垫。

已发现各含50%的IPA和水的混合溶液，能有效地除去HPLC系统的溶液管线里，毛细管里，以及流动池里的污染物。水能清除盐类和其他的污染物，IPA能清除极性和非极性的污染物。

准备一瓶各含50%的IPA和水的混合溶剂，并对溶剂脱气。将所有的溶剂管线连到这个瓶子里(例如连四元泵的A,B,C和D溶剂管线，连二元泵的A和B溶剂管线，连单元泵的溶剂管线)。安捷伦荧光检测器G1321A FLD

可以关掉所有检测器的灯，如果不希望IPA和水的混合液通过柱子时，可以在柱子的位置安装一个两通接头替换它。

**注意这个过程适用于标准密封垫而非正向密封垫。这种过程会损坏正向密封垫。

当新的密封垫安装之后，初始的磨合过程仍然是需要的。

Pump ISOPROPANOL经受至少350 bar的背压15-30分钟。此时最好使用一根旧柱子或者一个流量阻尼器。

为了获得最好的性能，示差需要混合溶液，建议首选单元泵。

用梯度泵混合溶剂会使基线不稳定。

如果是二元泵，只用一个通道，将另一个通道关闭。安捷伦荧光检测器G1321A FLD

在四元泵的情况下，只接一个通道，并将比例阀旁路关掉。这需要一个附加的接头(part no. 0100-1847) 接到主动进口阀上，直接将溶剂管线连到进口阀上 (代替接到比例阀上)。

化学工作站软件有一个在线的图谱窗口，显示从所连的检测器收到的信号。当样品打进去之后，一根红色的垂直起始线就会显示在在线图谱窗口中。红色线表明软件开始收集原始数据。如果这根红色线不出现，数据将不会被收集。检查所有连接到1100/1200系列LC的CAN电缆。如果安装了A/D转换器(35900 ADC)，在ADC与一个1100/1200组件之间要连一根遥控电缆。

14.6 psi = 1 bar

Agilent 易弯折的不锈钢毛细管线外表面上的颜色标记，指示管子的内径 (ID)

红色 指示内径为 0.12 mm 或者 0.005 英寸。安捷伦荧光检测器G1321A FLD

绿色 指示内径为 0.17 mm.或者 0.007 英寸。

蓝色 指示内径为 0.25 mm 或者 0.010英寸。

桔色 指示内径为 0.50 mm 或者 0.020 英寸。

由于在未准备好的情况下，VWD不能初始化一次运行，就出现这个错误。未准备好的状态可以从系统中任一组件产生。检查所有组件的准备状态。最普通的原因是，柱温箱的温度设置，它保持有困难，或连到A/D转换器或非Agilent产品的遥控电缆松动 。一旦未准备好的情况被纠正，就可以简单的再次启动运行。

如果不能纠正问题，建议联系Agilent公司技术支持。

高浓度的缓蚀液会减少四元泵的密封垫及柱塞的寿命。密封垫清洗选项，用清洗溶液冲洗密封垫的另一侧，以维护密封垫的寿命。 如果缓蚀液的浓度为0.01 M或更高，常时间地用于四元泵，则强力推荐使用密封垫清洗选项，作为二元泵的通用部件。

连续密封垫清洗选项可用订货号01018-68722订货（它包括用于一个泵头的零件）。密封垫清洗选项，包括一个支持环，第二级密封垫，密封膜, 以及每个柱塞一侧的密封垫固定件。清洗瓶装水/异丙醇(90/10vol%)溶液放在四元泵上边的溶剂瓶箱里，重力将使溶液流过泵头。

可以。G1352A是将一台1100/1200单元泵升级为四元泵所需要的产品号。这个套件包括比例阀，溶剂瓶，过滤头和管线。

实质上可以检测到所有的化合物。检测基于所有分析物的通用属性，不需要存在发色基团和电活化基团等。检测器的响应直接与洗提过的化合物质量相关。可以获得无法识别化合物的精确定量分析数据。

安捷伦1200系列ELSD完全兼容于高分离度液相色谱（RRLC）（宽度为1秒或以上）的快速发展应用领域。在RRLC色谱柱中，使用填装亚二微米微粒的色谱柱。支持专利气体的聚焦，聚焦样品分子，改进的光学头设计让检测器准备好处理RRLC中生成的快速色谱图。柱室温度最高可设置为100°C，以便优化分离度和最小化背压。

不需要。安捷伦1200系列 ELSD可以直接连接至安捷伦1200系列HPLC，并且可以通过RS232电缆直接与安捷伦色谱数据进行通信。

安捷伦1200系列ELSD带有四个雾化器，因而可以使用从5 μL/min 到5 mL/min的流速。因此，它适用于所有的HPLC模式，包括 RRLC（只需简单地更换雾化器）。安捷伦荧光检测器G1321A FLD

相比于其它检测类型，例如 UV 或者荧光（FLD），蒸发光散射（ELSD）检测器更加通用，它能够检测挥发性低于流动相的任何化合物。通过 UV 或者荧光检测，用户根本无法确定是否检测到样品中的所有化合物。蒸发光散射检测法解决了这种不确定性。

建议安捷伦1200系列ELSD将分析级氮气用作雾化。

安捷伦1200系列 ELSD中的低温技术把挥发作用降低到最低程度，并且能够显著提高灵敏性。

对于挥发性低于流动相的化合物，蒸发光散射检测器（ELSD）能够有效地执行敏感检测。 它提供了一种在等度和梯度条件下实质上通用的测量法，独立于化合物的吸收、荧光性或电活性。低温蒸发技术能够检测半挥发性性和低水平感热性化合物。安捷伦荧光检测器G1321A FLD

1.拉下【View(视图)】菜单，并且选择【Method and Run Contro(方法和运行控制)】

2. .拉下【Instrument(仪器)】菜单，然后选择【More Injector(更多注射器)】

3.从【More Injector(更多注射器)】菜单，选择【Sample Thermostat(样品恒温器)】

4.出现【Sample Thermostat(样品恒温器)】对话框，让您指定注射器托盘中的样品温度。

Volumes（体积）组让您ON（打开）和OFF（关闭）温度控制器。

Temperature（温度）组让您设置温度，或者OFF（关闭）温度控制器。

选择Turn Thermostat on（打开恒温器），当仪器接通电源时打开恒温器。

您可以设置用于自动打开灯的日期和时间。选择 [Turn thermostat on at（打开恒温器的日期和时间）]：启用日期和时间字段，并且在适当的字段中输入指定格式的日期和时间。

灯强度测试通过参照二极管扫描强度光谱，波长范围为200到650 nm，共分三个步骤。扫描图保存在诊断缓冲器中，并且在图形窗口中显示出来。不执行进一步的评估。为了消除由于吸收溶剂而带来的影响，执行这种测试时，流通池中应装有水；可以通过化学工作站软件执行FLD灯强度测试。

1.如果尚未显示出来，请下拉View(视图)菜单，然后选择Diagnosis(诊断)

2.拉下Diagnosis(诊断)菜单，然后选择Tests(测试)安捷伦荧光检测器G1321A FLD

3.选择Detector(检测器)选项卡和FLD Lamp Intensity Test(FLD灯强度测试)

4.通过选择Start(开始)启动FLD灯强度测试

许多 Rheodyne 手控阀中的标准转子密封圈用 Vespel 混合物制成。这种聚酰亚胺具有低磨损度和高化学稳定性等特点。Vespel可接受的pH值范围是0到10。碱性高于pH10的溶液会溶解Vespel，这会损坏转子密封圈。如果使用碱性高于pH 10的溶液，Rheodyne 建议使用PEEK（聚醚醚酮）混合物制成的转子密封圈。PEEK（聚醚醚酮）具有高化学稳定性和通用性，可接受从0到14的整个pH值范围。Tefzel混合物制成的转子密封圈可能适用于某些用途。正宗的Rheodyne转子密封圈可提供无与伦比的性能和产品使用寿命。在四分之一的世纪里，这些密封圈很好地满足了色谱仪操作员的需求并且超出了他们的期望。这种转子密封圈经过严格的制造和质量保证过程之后，才被安装到我们的阀门上或提供给我们的客户。只有正宗的Rheodyne部件才能确保Rheodyne阀具有持续精确的性能。Rheodyne工程师开发出严格的产品规格和设计，包括工厂安装的转子密封圈，有助于优化转子密封圈的效率。Rheodyne转子密封圈必须通过苛刻得让人难以置信的性能标准。Rheodyne转子密封圈由采用专利技术的聚合物制成，这种材料经过特别配制而成，可在0到14的整个pH值范围内抵抗反复的化学和物理应力。安捷伦荧光检测器G1321A FLD

折光率检测器二极管平衡值超出运行范围，因此被报告为发生错误。利用正在使用的流动相冲洗参比池。执行RID光学平衡程序。

经证明，磷酸洗涤剂能有效减少由于样品与HPLC系统中的金属络合而导致的拖尾。一般建议用1% 磷酸来清洗系统和色谱柱，以此消除这种脱尾现象，这很有效。在安捷伦ZORBAX StableBond反相HPLC 产品上使用这些推荐的清洗条件会取得非常理想的效果。StableBond HPLC色谱柱在低PH条件下性能非常稳定- SB-C18色谱柱在0.8 PH值和9.0PH条件下可保持稳定。如何肯定峰拖尾是由于金属络合而引起的？只要辨别N或O原子上的孤对电子能否与金属螯合并形成5或者6元环。金属络合物是一个普遍被忽视的峰拖尾成因，每个HPLC系统中都存在金属。

由于我不了解样品的化学性和有关流动相或色谱柱的详细情况，所以我很难回答这个问题。峰拖尾可能由多种原因引起，在回答您的问题之前，我想问您几个有关样品的问题。由于您色谱图中大多数峰的形状都是完好的，只有一个峰出现拖尾，我猜想色谱柱和样品的化学性引起二次反应，从而导致安捷伦荧光检测器G1321A FLD峰拖尾。 更改流动相或选择另一个HPLC色谱柱能够减少这些二次反应。

为了防止过度加热泵，必须根据流动相的特性和持续时间来操作密封垫冲洗选购件。附带文件提供了一些有关密封垫冲洗问题的解释说明。请参考附带文件。

可以通过一根串行电缆实现控制计算机和仪器之安捷伦荧光检测器G1321A FLD间的通信。 可以供应一根8米长的RS-232电缆（零件号5181-1561）。

—实现独立性应用，并且向受化学工作站或者非安捷伦软件控制的所有LC提供相同的诊断能力

—适应测试，并且为各个级别用户提供一种有效的诊断工具。

—为研发（R&D）的开发者和最终生产测试的工程师提供一个独特的SW构架，为现场工程师和最终用户提供支持。

压力测试是一种快速的嵌入式测试，专门用来验证系安捷伦荧光检测器G1321A FLD统的密封性。 这种测试将监控流量剖面，与此同时二元泵SL将传输一个六角空白螺母。 结果将显示泵的泄漏速度，并且提供关于二元泵SL和六角空白螺母出口球阀之间的系统密封性信息。

六角空白螺母可以放置于泵的放气阀和检测器入口之间的任意位置，对系统的指定部位进行压力测试。

请注意切勿将流体槽包含在压力测试内，因为施加的压力可能会导致许多类型的检测器流体槽（例如FLD、RID等）永久性泄漏或爆裂。

现在有很多问题是由于用户的流动相含有盐成分造成的。建议用户在清洗时将水加热后再冲洗，这样既可以将盐溶解的更好，也可以溶解一些脂溶性物质，会减少很多问题的发生，包括管路堵塞，盐析出，基线噪音……

HPLC出“鬼峰” 大部分发生在反相体系（甲醇， 乙腈， 水），是溶剂被污染造成的。还有一种原因是进样系统有残留。

--让用户运行一个空白梯度洗脱的方法，从100%水过渡到100%有机溶剂，如果“鬼峰”出现，可以判断是水被污染了（水中有藻类Algae的污染）。如果用户是使用纯水机制作的水，这种现象是最常见的。建议更换“娃哈哈”纯净水。

--进样系统有残留很容易判断，建议用户加强或改善洗针程序，延长冲洗Loop的时间。

引起这种问题的因素很多，要一步一步排除，直到找到问题真正原因。

--确定柱前压稳定；溶剂（高纯度的有机溶剂，水）使用正确。流动相脱气良好（请参考第2条）；

--检查检测器的氘灯是否已经到了使用寿命，是否更换过新的氘灯。DAD光强度测试可见光不通过，也可能是氘灯问题，因为氘灯用久了外部发黑挡住了可见光的通过。

--用异丙醇清洗整个系统，更换过滤芯，排除污染源。

--清洗流通池和有关的透镜（需要工程师去现场服务）安捷伦荧光检测器G1321A FLD

1.如果针头或针座经常堵塞，请检查您使用的进样瓶隔垫。质量不好和已经破损的隔垫易产生很多碎屑。进样时，这些细小的碎屑很容易将针头，针座堵塞。使用Agilent的正规隔垫并且经常更换旧的隔垫就可以避免这类问题。

2.如果您的样品经过离心处理，用针头吸取上清液进样，请将针头进样位置提高。

3.如果针头或针座发生了堵塞，可以用以下简单的办法处理：通过Chemstation诊断界面的更换针头，针座的程序将其取下，反接到泵的出口，用反吹的办法将其疏通。大部分是可以顺利解决的。

如果HPLC系统配有自动进样器，这种情况主要是自动进样器的问题。

--首先确认柱前压是稳定的，保留时间的重现性号（参见第1,2条）

--将自动进样器的抽样速度降低到50ul/min以下（默认值是200ul/min）.您的样品有可能粘度较大，降低抽样速度可以极大地改善粘度较大的样品的进样精度。

--如果进样针或针座有轻微的堵塞，对进样精度的影安捷伦荧光检测器G1321A FLD响也非常大。请参考第5条的处理办法。

--如果是手动进样器，请确认一定要使用Agilent配的标准进样针，且进样器的废液出口要与进样口水平，避免虹吸的影响。如果是满Loop进样，建议注射5倍Loop的进样体积。

如果是排气阀里的过滤芯堵塞引起的压力升高，请仔细检查一下换下来的过滤芯。正常情况下，一个过滤芯可以使用6个月左右，如果经常更换就有问题。

--如果过滤芯的颜色发黑，说明是被柱塞密封垫磨损下来的碎屑堵塞的，请确认流动相使用的缓冲盐的浓度是否太高了，是否使用了柱塞清洗装置。缓冲液在泵头内部析出的盐的结晶会加速密封垫的磨损。

--如果过滤芯的颜色是乳白色的，非常干净。说明过滤芯很有可能是被流动相污染了。请检查一下您是否使用了过期的溶剂（水，有机溶剂），或质量不好的溶剂。请马上更换别的品牌的溶剂或使用纯净水（推荐：娃哈哈纯净水）。

 如果流动相经过了滤膜过滤，请确认是否使安捷伦荧光检测器G1321A FLD用了正确的，优质的滤膜。建议您先不要使用滤膜过滤流动相，看看是否可以解决过滤芯堵塞的问题。

--如果存放缓冲液或水的溶剂瓶不经常清洗，该通路会生长藻类，藻类会污染整个流路系统和脱气机的腔体，藻类及其代谢产物也会堵塞过滤芯。如果发生了这种情况，建议用60度的热水清洗溶剂瓶，并用异丙醇清洗整个管路和脱气机。建议以后一定要用棕色瓶存放缓冲溶液，避光，并且定期清洗溶剂瓶。

--用户换了白头压力升高很快，还可以加一点，让用户检查一下白头是否太长，因为太长的白头如果不切平加进去压力也会升高很快。

引起这种故障最常见的原因是泵里有气泡，建议用以下的方法排除。

--如果您的系统没有配置脱气机（二元泵），溶剂一定要经常超声脱气。

--脱气机的效率不够，特别是用甲醇/水的系统最容易发生。可以将A，B通道串联；C，D通道串联用来延长脱气的时间，效果非常明显。

主动阀阀芯污染。可以将阀芯取下，用甲醇超声清洗。

保留时间不重现还会影响到峰面积的重现性，导致实验无法进行。引起这种现象因素很多，建议检查以下几个方面：