安捷伦色谱仪,岛津色谱仪，waters色谱仪优缺点，大牛十多年经验！_技术文章

问题：用的是安捷伦1200高效相色谱仪，排气时用5ml/min流速排气，压力迅速飙升到400bar,排气阀的小白头是一个月前刚刚换过的，出现这个情况实在不知道怎么回事？处理方法：1、打开purge阀，断开色谱柱连接，用70度的高纯热水以5毫升/分钟流速依次冲洗各个流路，每个通道冲洗时间不少于20分钟；然后各个通道以甲醇置换。2、断开检测器联接，检查正常的1毫升/分钟流速时的柱压情况；断开色谱柱连接，重复检查正常的1毫升/分钟流速时的柱压情况。判断堵塞的部位在那个地方。3、更换或者截掉那一段堵塞部位的管路，即可顺利解决问题。4、其中1、的操作应该每隔4个月就做一次，以保证对使用一段时间的通道进行1次彻底的清洁。若仪器使用频繁时，间隔时间可以缩短至2-3个月。5、用缓冲盐、是不是残留在小白头上了，残留会使得柱前压猛增，另外我们用2-3的流速完全可以排净气泡的，楼主压力可以调整一下。如果楼主怀疑是管路堵了，可以一段一段的断开检查，这样效率最高。6、卸下来看看，很黑的话旧的换了。400Bar太大了，是不是流动相或者管路的问题。7、开了的，拧上以后用60%的水，40%的水，压力到时正常140几bar。就是排气的时候出现这个情况。问题：做了快一个月的液相了，不知道为啥同一个样品进两次样有时峰面积差别好大，，做标准曲线时也是。处理建议：1、样品肯定要过膜，这是为了防止堵塞色谱柱，另外流动相超生是为了出去流动相里面的空气，如果是现在比较新的液相色谱的话，应该不用超生就可以的，但是如果是以前比较旧的液相色谱建议还是超生15到20分钟吧，你没有超生那么长时间应该问题也不大。同一个样品进两次峰面积不同有可能是样品是不是放置了一段时间，试着看一下平行样的峰面积怎么样；还有就是是不是时间太短了，有部分样品没有完全走出来，建议两个样品之间走一个空针试一下；最后还有可能就是仪器的问题了，因为最后彩石怀疑仪器。2、液相肯定是要过膜的，抽滤过膜，而且膜分有机和水膜两种！有机膜过有机流动相，水膜只能过水，然后得超声30min,以去除溶解的气体，要不然对柱子不好！另外做标线最高浓度先低后高，要不然会有影响！关于流动相超声，主要目的是为了脱气，所以如果你的系统里没有气泡，这个问题排除。3、关于样品过膜，主要目的是为了保护进样口和色谱柱，以免不溶颗粒损伤机器。但基本上这个对你出峰面积没有影响。如果你的问题主要集中在同一样品出现很大差别的峰面积的情况，你可以考虑以下几点：4、如果是手动进样，那样确保自己的进样手法稳定；如果是机器进样，那么要排查一下系统进样器是否有故障。5、另一种可能是你的峰型不完美，或杂峰太多，导致机器自动积分有误差。比如基线可能不平，有时候自动积分的时候把别的小峰也算进去了。6、也可能是流动相并不能完全将样品峰洗脱下来，导致有时候出的多有时候出的少，结果不稳定。转载于瑞析科技www.hz-rush.com

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